HPLC对饲料中三聚氰胺的测定

方案优势

略

采用标准

《NY／T1372．2007饲料中三聚氰胺的测定》

方法/原理/步骤

　　检测流程：

　　1、样品提取：称取2g(精确至0.01g)饲料样品于50mL玻璃比色管内，准确加入18mL乙腈-水(体积比1：1)和lmL乙酸锌、lmLHCl(1mol／L)漩涡混匀2min，超声提取20min，冷却，取上层提取液转入离心管中，9000ffmin离心5min。吸取上清液5mL再次转入离心管中，加入l0mL二氯甲烷，充分震荡2 min，以4000 r／min离心5 min，吸取上清液转移入玻璃离心管中待过柱。

　　2、样品净化：将固相萃取柱依次用3 mL甲醇和3 mL水活化后，准确移取上清液过柱，控制过柱速度不超过1.0mL／min。再依次用3 mL水和3 mL甲醇洗涤，弃去流出液。抽近干后，以5mL氨水-甲醇溶液(v／v：5／95)洗脱，收集流出液。洗脱液于50℃下水浴吹氮至干。

　　3、样品浓缩：准确加入1.0mL甲醇.水(v／V：2／8)溶液，涡旋混合l min，过0.2μm有机滤膜，待测。

　　4、分析：上机测定。

　　HPLC分析的色谱条件为：

　　固定相：SMT C18色谱柱4.6mmX250mmX5μm；

　　流动相：乙腈：离子对试剂8:92

　　流量：1.2mL/min

　　柱温：40℃

　　进样量：20μL

　　检测波长：236nm

　　出峰时间：5.12min

　　在兰博series 4000-荧光检测系统上进样，色谱图如下：

　　回收率：≥90%

　　精密度(RSD)：1%~2%

　　线性范围：0.1-50μg/mL

　　相关系数：≥0.9950

　　最低检出限：0.1mg/kg

　　低于国家限量规定

仪器设备

兰博series 4060高效液相色谱，兰博荧光检测器